கீல்வாதம் (OA) என்பது 65 வயதுக்கு மேற்பட்ட மக்களை பாதிக்கும் நீண்ட கால நாள்பட்ட சிதைந்த எலும்பு மூட்டு நோய்களில் ஒன்றாகும்.
1]. பொதுவாக, OA நோயாளிகளுக்கு சேதமடைந்த குருத்தெலும்பு, வீக்கமடைந்த சினோவியம் மற்றும் அரிக்கப்பட்ட காண்டிரோசைட்டுகள் ஆகியவை கண்டறியப்படுகின்றன, அவை வலி மற்றும் உடல் உபாதைகளைத் தூண்டும்.
2]. மூட்டுவலி முக்கியமாக மூட்டுகளில் உள்ள குருத்தெலும்பு வீக்கத்தால் சிதைவதால் ஏற்படுகிறது, மேலும் குருத்தெலும்பு கடுமையாக சேதமடையும் போது எலும்புகள் ஒன்றோடு ஒன்று மோதி தாங்க முடியாத வலி மற்றும் உடல் ரீதியான சிரமங்களை ஏற்படுத்துகிறது.
3]. வலி, வீக்கம் மற்றும் மூட்டு விறைப்பு போன்ற அறிகுறிகளுடன் அழற்சி மத்தியஸ்தர்களின் ஈடுபாடு நன்கு ஆவணப்படுத்தப்பட்டுள்ளது. OA நோயாளிகளில், குருத்தெலும்பு மற்றும் சப்காண்ட்ரல் எலும்பின் அரிப்பை ஏற்படுத்தும் அழற்சி சைட்டோகைன்கள் சினோவியல் திரவத்தில் காணப்படுகின்றன.
4]. OA நோயாளிகளுக்கு பொதுவாக இருக்கும் இரண்டு முக்கிய புகார்கள் வலி மற்றும் சினோவியல் அழற்சி ஆகும். எனவே தற்போதைய OA சிகிச்சையின் முதன்மை இலக்குகள் வலி மற்றும் வீக்கத்தைக் குறைப்பதாகும். [
5]. ஸ்டெராய்டல் அல்லாத மற்றும் ஸ்டெராய்டல் மருந்துகள் உட்பட கிடைக்கக்கூடிய OA சிகிச்சைகள் வலி மற்றும் வீக்கத்தைக் குறைப்பதில் செயல்திறன் நிரூபிக்கப்பட்டிருந்தாலும், இந்த மருந்துகளின் நீண்டகால பயன்பாடுகள் இருதய, இரைப்பை-குடல் மற்றும் சிறுநீரக செயலிழப்பு போன்ற கடுமையான உடல்நல விளைவுகளை ஏற்படுத்துகின்றன.
6]. எனவே, கீல்வாத சிகிச்சைக்கு குறைவான பக்கவிளைவுகளைக் கொண்ட மிகவும் பயனுள்ள மருந்து உருவாக்கப்பட வேண்டும்.
இயற்கையான சுகாதாரப் பொருட்கள் பாதுகாப்பாகவும் எளிதாகவும் கிடைப்பதற்காக பிரபலமடைந்து வருகின்றன.
7]. பாரம்பரிய கொரிய மருந்துகள், கீல்வாதம் உட்பட பல அழற்சி நோய்களுக்கு எதிரான செயல்திறனை நிரூபித்துள்ளன.
8]. ஆக்லாண்டியா லப்பா டிசி. அதன் மருத்துவ குணங்களுக்காக அறியப்படுகிறது, அதாவது குய்யின் சுழற்சியை மேம்படுத்துதல் மற்றும் வயிற்றை அமைதிப்படுத்துதல் மற்றும் இயற்கையான வலி நிவாரணியாக பாரம்பரியமாக பயன்படுத்தப்படுகிறது.
9]. முந்தைய அறிக்கைகள் ஏ.லப்பாவுக்கு அழற்சி எதிர்ப்பு [
10,
11], வலி நிவாரணி [
12], புற்றுநோய் எதிர்ப்பு [
13], மற்றும் காஸ்ட்ரோப்ரொடெக்டிவ் [
14] விளைவுகள். A. லாப்பாவின் பல்வேறு உயிரியல் செயல்பாடுகள் அதன் முக்கிய செயலில் உள்ள சேர்மங்களால் ஏற்படுகின்றன: காஸ்டுனோலைடு, டீஹைட்ரோகோஸ்டஸ் லாக்டோன், டைஹைட்ரோகோஸ்டுனோலைடு, காஸ்டுஸ்லாக்டோன், α-காஸ்டோல், சாசுரியா லாக்டோன் மற்றும் காஸ்டஸ்லாக்டோன் [
15]. முந்தைய ஆய்வுகள் லிப்போபோலிசாக்கரைடு (LPS) இல் காஸ்டுனோலைடு அழற்சி எதிர்ப்பு பண்புகளைக் காட்டியதாகக் கூறுகிறது, இது NF-kB மற்றும் வெப்ப அதிர்ச்சி புரதப் பாதையின் கட்டுப்பாடு மூலம் மேக்ரோபேஜ்களைத் தூண்டியது.
16,
17]. இருப்பினும், OA சிகிச்சைக்கான A. லாப்பாவின் சாத்தியமான செயல்பாடுகளை எந்த ஆய்வும் ஆராயவில்லை. தற்போதைய ஆராய்ச்சியானது (மோனோசோடியம்-அயோடோஅசெட்டேட்) MIA மற்றும் அசிட்டிக் அமிலத்தால் தூண்டப்பட்ட கொறித்துண்ணி மாதிரிகளைப் பயன்படுத்தி OA க்கு எதிராக A. லாப்பாவின் சிகிச்சை விளைவுகளை ஆய்வு செய்துள்ளது.
மோனோசோடியம்-அயோடோஅசெட்டேட் (MIA) என்பது விலங்குகளில் வலி நடத்தைகள் மற்றும் OA இன் நோயியல் இயற்பியல் அம்சங்களை உருவாக்க பிரபலமாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது.
18,
19,
20]. முழங்கால் மூட்டுகளில் உட்செலுத்தப்படும் போது, MIA காண்டிரோசைட் வளர்சிதை மாற்றத்தை சீர்குலைக்கிறது மற்றும் OA இன் முக்கிய அறிகுறிகளான குருத்தெலும்பு மற்றும் சப்காண்ட்ரல் எலும்பு அரிப்பு போன்ற அழற்சி மற்றும் அழற்சி அறிகுறிகளைத் தூண்டுகிறது.
18]. அசிட்டிக் அமிலத்தால் தூண்டப்பட்ட ரைட்டிங் எதிர்வினை விலங்குகளில் ஏற்படும் புற வலியின் உருவகப்படுத்துதலாக பரவலாகக் கருதப்படுகிறது, அங்கு அழற்சி வலியை அளவுகோலாக அளவிட முடியும்.
19]. மவுஸ் மேக்ரோபேஜ் செல் லைன், RAW264.7, வீக்கத்திற்கான செல்லுலார் பதில்களைப் படிக்க பிரபலமாகப் பயன்படுத்தப்படுகிறது. LPS உடன் செயல்படும் போது, RAW264 மேக்ரோபேஜ்கள் அழற்சிப் பாதைகளைச் செயல்படுத்துகின்றன மற்றும் TNF-α, COX-2, IL-1β, iNOS மற்றும் IL-6 போன்ற பல அழற்சி இடைநிலைகளை சுரக்கின்றன.
20]. MIA விலங்கு மாதிரி, அசிட்டிக் அமிலத்தால் தூண்டப்பட்ட விலங்கு மாதிரி மற்றும் LPS-செயல்படுத்தப்பட்ட RAW264.7 செல்கள் ஆகியவற்றில் OA க்கு எதிராக A. லாப்பாவின் எதிர்ப்பு நோசிசெப்டிவ் மற்றும் அழற்சி எதிர்ப்பு விளைவுகளை இந்த ஆய்வு மதிப்பீடு செய்துள்ளது.
2. பொருட்கள் மற்றும் முறைகள்
2.1 தாவர பொருள்
ஏ.லப்பா டிசியின் உலர்ந்த வேர். சோதனையில் பயன்படுத்தப்பட்டது Epulip Pharmaceutical Co., Ltd., (Seoul, Korea) இலிருந்து வாங்கப்பட்டது. கச்சோன் பல்கலைக்கழகத்தின் கொரிய மருத்துவத்தின் கர்னல், மூலிகை மருந்தியல் துறை பேராசிரியர் டோங்குன் லீ என்பவரால் இது அடையாளம் காணப்பட்டது, மேலும் வவுச்சர் மாதிரி எண் 18060301 என டெபாசிட் செய்யப்பட்டது.
2.2 A. லாப்பா சாற்றின் HPLC பகுப்பாய்வு
A. லப்பா ரிஃப்ளக்ஸ் கருவியைப் பயன்படுத்தி பிரித்தெடுக்கப்பட்டது (காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர், 100 °C இல் 3 மணிநேரம்). பிரித்தெடுக்கப்பட்ட கரைசல் குறைந்த அழுத்த ஆவியாக்கியைப் பயன்படுத்தி வடிகட்டப்பட்டு ஒடுக்கப்பட்டது. A. லப்பா சாறு −80 °Cக்கு கீழ் உறைந்த உலர்த்திய பிறகு 44.69% மகசூல் பெற்றது. 1260 இன்ஃபினிட்டிⅡ HPLC-அமைப்பை (Agilent, Pal Alto, CA, USA) பயன்படுத்தி இணைக்கப்பட்ட HPLC உடன் A. லாப்பாவின் குரோமடோகிராஃபிக் பகுப்பாய்வு நடத்தப்பட்டது. வர்ணப் பிரிப்புக்கு, EclipseXDB C18 நெடுவரிசை (4.6 × 250 மிமீ, 5 µm, அஜிலன்ட்) 35 °C இல் பயன்படுத்தப்பட்டது. மொத்தம் 100 மில்லிகிராம் மாதிரியானது 10 மில்லி 50% மெத்தனாலில் நீர்த்தப்பட்டு 10 நிமிடங்களுக்கு ஒலிக்கப்பட்டது. மாதிரிகள் 0.45 μm ஒரு சிரிஞ்ச் வடிகட்டி (வாட்டர்ஸ் கார்ப்., மில்ஃபோர்ட், MA, USA) மூலம் வடிகட்டப்பட்டன. மொபைல் கட்ட கலவை 0.1% பாஸ்போரிக் அமிலம் (A) மற்றும் அசிட்டோனிட்ரைல் (B) மற்றும் நெடுவரிசை பின்வருமாறு நீக்கப்பட்டது: 0-60 நிமிடம், 0%; 60-65 நிமிடம், 100%; 65-67 நிமிடம், 100%; 67-72 நிமிடம், 0% கரைப்பான் B 1.0 mL/min ஓட்ட விகிதத்துடன். 10 μL இன் ஊசி அளவைப் பயன்படுத்தி 210 nm இல் கழிவுநீர் காணப்பட்டது. பகுப்பாய்வு மும்மடங்காக செய்யப்பட்டது.
2.3 விலங்கு வீட்டுவசதி மற்றும் மேலாண்மை
5 வார வயதுடைய ஆண் ஸ்ப்ராக்-டாவ்லி (SD) எலிகள் மற்றும் 6 வார வயதுடைய ஆண் ICR எலிகள் Samtako Bio Korea (Gyeonggi-do, Korea) இலிருந்து வாங்கப்பட்டன. நிலையான வெப்பநிலை (22 ± 2 °C) மற்றும் ஈரப்பதம் (55 ± 10%) மற்றும் 12/12 மணிநேர ஒளி/இருண்ட சுழற்சியைப் பயன்படுத்தி விலங்குகள் ஒரு அறையில் வைக்கப்பட்டன. சோதனை தொடங்குவதற்கு ஒரு வாரத்திற்கும் மேலாக விலங்குகள் நிலைமையை நன்கு அறிந்திருந்தன. விலங்குகளுக்குத் தீவனம் மற்றும் தண்ணீரின் தற்செயலான விநியோகம் இருந்தது. Gachon பல்கலைக்கழகத்தில் (GIACUC-R2019003) விலங்கு பராமரிப்பு மற்றும் கையாளுதலுக்கான தற்போதைய நெறிமுறை விதிகள் அனைத்து விலங்கு பரிசோதனை நடைமுறைகளிலும் கண்டிப்பாக பின்பற்றப்படுகின்றன. ஆய்வு புலனாய்வாளர்-குருட்டு மற்றும் இணையான சோதனை வடிவமைக்கப்பட்டது. விலங்கு பரிசோதனை நெறிமுறைக் குழுவின் வழிகாட்டுதலின்படி கருணைக்கொலை முறையைப் பின்பற்றினோம்.
2.4 MIA ஊசி மற்றும் சிகிச்சை
எலிகள் தோராயமாக 4 குழுக்களாக பிரிக்கப்பட்டன, அதாவது ஷாம், கட்டுப்பாடு, இண்டோமெதசின் மற்றும் ஏ.லப்பா. 2% ஐசோபுளோரேன் O2 கலவையுடன் மயக்க மருந்து கொடுக்கப்பட்டு, எலிகளுக்கு 50 μL MIA (40 mg/m; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) பயன்படுத்தி முழங்கால் மூட்டுகளுக்குள் செலுத்தப்பட்டு சோதனை OA க்கு வழிவகுக்கும். சிகிச்சைகள் கீழ்கண்டவாறு நடத்தப்பட்டன: AIN-93G அடிப்படை உணவுடன் மட்டுமே கட்டுப்பாடு மற்றும் போலிக் குழுக்கள் பராமரிக்கப்பட்டன. ஏஐஎன்-93ஜி உணவில் இண்டோமெதசின் (3 மி.கி./கி.கி.) சேர்க்கப்பட்டு, ஏ.லாப்பா (300 மி.கி./கி.கி) உடன் கூடுதலாக ஏ.ஐ.என்-93ஜி உணவுக்கு ஏ.லாப்பா 300 மி.கி/கி.கி. தினசரி அடிப்படையில் 190-210 கிராம் உடல் எடைக்கு 15-17 கிராம் என்ற விகிதத்தில் OA தூண்டப்பட்ட நாளிலிருந்து 24 நாட்களுக்கு சிகிச்சைகள் தொடர்ந்தன.
2.5 எடை தாங்கும் அளவீடு
OA தூண்டலுக்குப் பிறகு, எலிகளின் பின்னங்கால்களின் எடை தாங்கும் திறன் அளவீடு திட்டமிடப்பட்டபடி இயலாமை-MeterTester600 (IITC Life Science, Woodland Hills, CA, USA) மூலம் செய்யப்பட்டது. பின் மூட்டுகளில் எடை விநியோகம் கணக்கிடப்பட்டது: எடை தாங்கும் திறன் (%)
